一.ELISA試劑盒的試劑，超卓的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測效果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的構成不同而有所差異，國內醫學查驗一般均用板式點。本文將敘說板式ELISA各個操作進程的留心要害，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特別儀器協作運用，嚴峻遵照規矩操作，必能得出準確的效果。 
 
二.可用作ELISA試劑盒的標本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其間某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液)，有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均對等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只需待血清天然凝聚、縮短后即可取得。除特別狀況外，在醫學查驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可對等運用。
 
三. ELISA試劑盒血清標本可按常規辦法搜集，應留心避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標本可能會添加非特異性顯色。  
 
四.血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會發生假陽性反應。如在冰箱中保存過久，其間的可發生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。 
 
五.一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，逾越一周測定的需低溫冰存。凍住血清融解后，蛋白質部分濃縮，散布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上劇烈振動。混濁或有沉積的血清標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。重復凍融會使抗體效價下跌，所以測抗體的血清標本如需保存作屢次檢測，宜少數分裝冰存。保存血清自搜集時就應留心無菌操作，也可參與恰當防腐劑。  
 
六.按試劑盒說明書的要求預備試驗中需用的試劑。ELISA試劑盒頂用的蒸餾水或去離子水，包含用于洗刷的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液運用pH計丈量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后運用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。
 
七.在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留心不可濺起，不可發生氣泡。
 
八.ELISA試劑盒加標本一般用微量加樣器，按規矩的量參與板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以發生穿插污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀的血清，可在試管中按規矩的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參與稀釋液，再在其參與血清標本，然后在微型顫抖器上顫抖1分鐘以保證混和。加酶結合物運用液和底物用液時可用定量多道加液器，使加液進程靈敏結束